21.07.2019      5      0
 

Бактериологический посев (бакпосев) — cимптомы и лечение. Журнал Медикал


Что такое посев на чувствительность к антибиотикам

Посев на чувствительность, называемый еще бакпосевом на микрофлору – это вид исследования, применяемый при диагностике венерологических, гинекологических, урологических, дерматологических и других инфекционных заболеваний.

После забора биологического материала производится его посев в различные питательные среды. Спустя некоторое время «разросшиеся» на нем в результате искусственного культивирования микроорганизмы тестируют на чувствительность к разным типам антибиотиков или противомикробных препаратов.

Исследование, называемое антибиотикограммой, демонстрирует, от препаратов какой фармакологической группы быстрее всего погибнет возбудитель инфекции. Кроме того, анализ определяет концентрацию патогенных микроорганизмов (выражается в КОЕ/мл, называемых колониеобразующими единицами), их резистентность (устойчивость) по отношению к медикаментозным средствам и внешним факторам. Для проведения исследования могут забираться следующие биоматериалы:

  • кровь;
  • урина;
  • желчь;
  • кал;
  • сперма;
  • спинномозговая жидкость;
  • слизь из уретры;
  • слизь из цервикального канала;
  • слизь из зева;
  • слизь из носоглотки;
  • мокрота;
  • содержимое кисты;
  • содержимое очага воспаления;
  • раневое отделяемое;
  • грудное молоко;
  • секрет простаты.

Выращивание колоний патогенных микроорганизмов на исследуемых материалах проводят в чашках Петри, либо сначала в жидкой среде, а затем на скошенном агаре в термостате на протяжении суток. После штаммы полученной культуры переносят на предметное стекло, окрашивают и изучают морфологические свойства микроорганизма под микроскопом.

Определение чувствительности выделенного микроорганизма к тому или иному антибактериальному препарату является важной составляющей бактериологического исследования. Набор препаратов, к которому чувствителен или резистентен возбудитель, и является антибиотикограммой.

Антибиотикограмма

Чувствительность возбудителя – это восприимчивость к лекарственному препарату, то есть антибиотик подействует на рост и размножение микроба. Резистентность – устойчивость возбудителя к тому или иному препарату, то есть антибактериальный препарат не подействует.

Антибиотикограмма выдается в определенных единицах измерения – минимальной ингибирующей концентрации (МИК).

Врач инфекционист Быкова Н.И.

Виды исследуемых микроорганизмов

В зависимости от типа биоматериала и показаний к проведению анализа по результатам исследования выделяют следующие виды патогенных возбудителей бактериальных инфекций:

  1. Слизь из носоглотки и зева: золотистый стафилококк, гемолитический стрептококк, менингококк, листерия, коринебактерия дифтерии, гемофильная палочка, синегнойные пневмококки.
  2. Гнойное отделяемое, содержимое ран, биопунктат: синегнойная палочка, псевдомонада.
  3. Урогенитальная слизь: бактериальная флора, возбудители мочеполовых инфекций (микоплазма, гарднерелла, уреаплазма, трихомонада, грибы, гонококк, листерия).
  4. Каловые массы: тифопаратифозная бактериальная группа, кишечная группа (иерсинии, сальмонеллы, шигеллы), анаэробные возбудители пищевых инфекций, условно-патогенные возбудители кишечных инфекций.
  5. Кровь исследуют на стерильность.
  6. Остальные биожидкости – на обсемененность (бактериальную флору).

В слизи носа и зева можно обнаружить гемолитические стрептококки (Streptococcuc pyogenes, Streptococcuc agalactiae), пневмококки (Streptococcuc pneumoniae), золотистый стафилококк (Staphylococcus auereus), коринобактерии дифтерии (Corynebacterium diphtheriae), гемофильную палочку (Haemophilus influenzae типа b), менингококк (Neisseria meningitidis), листерии (Listeria).

В испражнениях пытаются выявить кишечную группу бактерий – салмонеллы и шигеллы (Salmonella spp., Shigella spp.) иерсинии (Iersiniae spp.), тифо-паратифозную группу бактерий (Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A, Salmonella paratyphi B), условно — патогенные возбудители кишечных инфекций, анаэробные микробы, возбудителей пищевых токсикоинфекций, а также обследовать кал на дисбактериоз кишечника.

В содержимом ран, биопунктате, гнойном отделяемом можно выявить псевдомонады или синегнойную палочку (Pseudomonas aeruginosa).

Слизь урогенитального тракта обследуют на предмет наличия в ней возбудителей инфекций, передающихся половым путем – гонококка, трихомонады, грибов (Neisseria gonorrhoeae ,Trichomonas vaginalis, грибы рода Candida), уреаплазму (Ureaplasma urealyticum), микоплазму (Mycoplasma hominis), листерии (Listeria), также можно исследовать мазок на бактериальную флору.

Кровь можно посеять (обследовать) на стерильность.

Бакпосев

Такие материалы, как грудное молоко, моча, секрет простаты, соскоб, мазок, раневое содержимое, суставная жидкость, желчь исследуют на общую обсемененность (бактериальную флору).

Подготовка к анализам

По статистике, около 80% ошибок в лабораторных исследованиях вызваны ошибками при сборе и транспортировке материалов для обследования. Как правило, забор осуществляет медицинский персонал, но некоторые биоматериалы больной собирает сам. Поэтому при подготовке к сдаче анализа необходимо соблюдать следующие общие правила:

  • Во время забора биоматериала требуется исключить попадание в него антисептических или дезинфицирующих соединений, обсеменения бактериями и иными организмами. Для этого инструментарий и посуда для сбора должны быть стерильными.
  • На результаты посева на антибиотики влияет прием пациентом антибактериальных и иных медикаментозных препаратов. О терапии необходимо сообщить назначившему анализ врачу, применение лекарств необходимо приостановить за срок не менее 10 суток до назначенной даты анализа.
  • Материалы для обследования должны быть доставлены в лабораторию в специальных герметичных контейнерах в максимально короткие сроки. Во время транспортировки собранные биологические жидкости должны быть защищены от воздействия света, температур, механического воздействия.

Правила забора биологического материала для бактериологического посева

Для исследования забираются следующие биологические среды организма человека: носоглоточная слизь, слизь из зева, секрет бронхиального дерева (мокрота), испражнения (кал), слизь уретры, цервикального канала, секрет простаты, моча, кровь, спинномозговая жидкость, грудное молоко, желчь, содержимое кист, воспалительных очагов, раневое отделяемое.

Баклаборатория

Качество проводимого бактериологического посева во многом зависит от правильности забора материала для исследования. Нужно помнить простое правило: стерильная посуда и стерильные инструменты! Несоблюдение этих требований приведет к контаминации (внешней обсемененности материала представителями кожи и слизистых, окружающей среды, не имеющих клинического значения), что автоматически сделает исследование бессмысленным.

Для забора материала используют стерильную посуду, которая выдается в самой бактериологической лаборатории на руки пациенту при амбулаторном обследовании, для забора испражнений, мочи. Из различных очагов воспаления забор проводится только стерильными инструментами (шпатели, петли, ложки) специально обученным медицинским работником (в поликлинике обычно это медсестра инфекционного или смотрового кабинетов).

Кровь и мочу собирают в сухие пробирки, остальные материалы в посуду с транспортной питательной средой.

Стерильная посуда для забора мочи и испражнений

Другое правило: забор материала до начала антибиотикотерапии! На фоне приема антибиотиков результат будет существенно искажен. Если принимали  такие препараты, то прекратить их прием за 10 дней до исследования и сообщить врачу о факте приема любых антибактериальных препаратов.

Женщина и врач

Должна быть обеспечена быстрая доставка в лабораторию! Микроорганизмы могут погибнуть при высыхании, изменении кислотности. Например, кал должен быть доставлен в теплом виде.

При заборе мочи: после утренних гигиенических процедур забирается средняя порция утренней мочи в количестве 10-15 мл в стерильную посуду. Доставить в лабораторию в течение 2х часов.

При заборе мазка из зева и носа: нельзя утром чистить зубы, полоскать рот и нос дезинфицирующими растворами, пить и есть.

Забор испражнений должен производиться утром стерильной лопаточкой в стерильную посуду в объеме 15-30 гр. Недопустимо попадание в пробу мочи. Доставка в течение 5 часов. Не допускается замораживание или ночное хранение. Собирать кал без применения клизм и слабительных.

Кровь для бакпосева берется до начала антибиотикотерапии на фоне подъема температуры в стерильную пробирку в количестве не менее 5 мл (детям), не менее 15 мл (взрослым).

Мокрота собирается утром натощак в стерильный контейнер во время приступа кашля со слизью. Перед забором почистить зубы и прополоскать рот кипяченой водой. Доставить в лабораторию в течение 1 часа.

Грудное молоко собирается после гигиенической процедуры. Околососковая область обрабатывается тампоном, смоченным 70% этиловым спиртом. Первые 15 мл сцеженного молока не используются. Затем 5 мл сцеживается в стерильный контейнер. Доставить в течение 2х часов.

Отделяемое половых органов: у женщин забор проводится не ранее, чем через 14 дней после менструации, не ранее чем через 1 месяц после отмены антибиотиков, желательно в течение 2х часов не мочиться; у мужчин – не рекомендуется мочиться в течение 5-6 часов до взятия пробы.

Как сдавать анализ

Бактериологический посев на чувствительность к антибиотикам проводится на разных видах биоматериала. В зависимости от их типа необходимо соблюдать следующие предписания специалистов при заборе проб:

  1. Сбор мочи производят по утрам, натощак, после предварительно проведенных гигиенических процедур. Необходимый объем урины составляет от 10 до 15 мл. Забор производят в специальную стерильную посуду, материал должен быть доставлен в лабораторию не позднее чем через два часа.
  2. Мазок на чувствительность к антибиотикам из носоглотки или зева проводят по утрам, до приема пищи и воды и до проведения гигиенических процедур (чистки зубов и полоскания рта).
  3. Сбор кала производится утром, стерильной лопаткой в стерильную посуду, необходимый объем биоматериала – до 30 мг. Недопустимо попадание мочи, использование клизмы или слабительных препаратов, замораживание. Срок доставки в лабораторию не должен превышать 3-5 часов.
  4. Проба мокроты доставляется в место проведения исследования на протяжении часа после забора, который проводят натощак, после предварительной чистки зубов и полоскания рта.
  5. Пробу грудного молока берут после проведения гигиенических процедур и обработки кожи вокруг соска спиртом. Перед забором материала в объеме 5 мл (в стерильную посуду) сцеживают от 15 мл жидкости. Время доставки в лабораторию не должно превышать 2 часов.
  6. Мазок со слизистых влагалища и другие виды забора материала на мочеполовые инфекции. Анализ проводят не ранее чем через 2 недели после окончания менструации (точную дату определит врач на основе данных о месячном цикле). Последнее мочеиспускание должно быть проведено за два часа до взятия пробы у женщин и за 5-6 – у мужчин.
  7. Объем забранной для посева крови у детей составляет 5 мл, у взрослых – 15 мл.

Сколько делается посев

Посев на флору и чувствительность к антибиотикам проводится в течение некоторого продолжительного времени (по сравнению с готовностью результатов других анализов). Выделение штаммов проводится не одинаково, потому что разные биологические среды человеческого организма требуют индивидуальных подходов. Примерные сроки результатов анализов для разных типов биоматериала:

  • Кал: от 5 дней до недели.
  • Урогенитальные материалы: 4-10 дней.
  • Кровь: 10-14 дней (первые предварительные данные готовы через 3-4 дня).
  • Слизь из зева или носоглотки: от 5 до 7 дней.
  • Посев на флору: 5-10 дней.

Что представляет собой бактериологический посев?

Материал для исследования в бактериологической лаборатории помещают (делают посев) на специальные питательные среды. В зависимости от желаемого поиска того или иного возбудителя или группы возбудителей посев производится на разные среды.

Например, это может быть избирательная или элективная питательная среда (для роста какого-то одного возбудителя, рост других микробов при этом угнетается), примером которых может быть свернутая лошадиная сыворотка для выявления возбудителей дифтерии или среда с селенитом или с солями желчных кислот для обнаружения кишечных возбудителей.

Другим примером могут быть дифференциально-диагностические среды (среда Гисса), которые используются для расшифровки бактериальных культур. При необходимости с жидких питательных сред делают пересев на твердые среды с целью большей идентификации колоний.

Бакпосев. Колонии на твердой среде

Затем питательные среды помещают в термостат (специальный прибор), в котором создаются благоприятные условия (температура, влажность и др.) для роста и размножения возбудителей, в термостате среды находятся определенное время.

Далее проводят контрольный осмотр выросших колоний микроорганизмов, которые называют «культурой микроорганизмов». При необходимости проводят микроскопию материала колоний с предварительной окраской специальными красителями.

Что оценивается при контрольном осмотре? Это форма, цвет, плотность колоний, после дополнительного исследования – способность разлагать некоторые неорганические и органические соединения.

Далее проводят подсчет возбудителей. При микробиологической исследовании учитывается такое понятие, как колониеобразующая единица (КОЕ) — одна микробная клетка, способная образовать колонию, или видимая колония микробов.

По КОЕ возможно определить концентрацию или количество микроорганизмов в исследуемом образце. Подсчет КОЕ проводится разными методами: подсчетом колоний под микроскопом, методом серийных разведений, секторным методом.

Расшифровка

Бактериологический посев на чувствительность к антибиотику дает представление о качественной и количественной оценке исследуемого образца. Качественная оценка (наличие возбудителя) классифицируется по следующим четырем степеням роста:

  1. Первая. При этой степени рост на твердой среде отсутствует, на жидкой регистрируется небольшой рост.
  2. Вторая. Небольшой рост на твердой среде (до 10 колоний).
  3. Третья. Значительный рост на твердой среде (10-100 колоний).
  4. Четвертая. Больше 100 колоний.

При обнаружении в результате исследования условно-патогенной микрофлоры (непатогенных грамотрицательных бактерий) первые две степени относят к норме, при третьей или четвертой степени говорят о присутствии в организме микробов-возбудителей инфекции, размножение которых стало причиной возникновения и развития заболевания.

Количественная оценка проводится в колониеобразующих единицах (КОЕ), обозначающих объединение (сообщество) клеток бактерий, образовавших колонию. Она помогает установить степень обсемененности и проконтролировать достаточность назначенных для лечения дозировок лекарственных средств (адекватность проведенных медикаментозных назначений). Принято следующее условное соотношение КОЕ и миллилитров:

  • 1 колония – это 103 КОЕ/мл.
  • 1-5 колоний – это 104 КОЕ/мл.
  • 5-15 колоний – это 105 КОЕ/мл.
  • более 15 колоний – это 106 КОЕ/мл

Тест на чувствительность к антибиотикам, проводимый одновременно с посевом на определение возбудителя инфекции, называют антибиотикограммой. Выделив патогенный микроорганизм, его пересаживают в благоприятную для роста среду, где исследуется резистентность (чувствительность) конкретного штамма к активным компонентам антибактериальных препаратов.

Медик с чашкой петри

Распространенным методом проведения антибиотикограммы является метод диффузии смоченных в антибактериальном препарате бумажных полосок в чашке Петри с исследуемой средой. Их выкладывают по поверхности, отступая на два сантиметра от края чашки и от друг друга.

  • Кольцо вокруг полоски диаметром от 2,5 см говорит о повышенной чувствительности микрофлоры к препарату;
  • 2,5-1,5 см – стандартная чувствительность (средняя клиническая эффективность).
  • до 1,5 см – слабая реакция, лечение с высокой вероятностью не будет эффективным.
  • Отсутствие задержки роста колонии – полная устойчивость к медикаментозному средству.

Расшифровкой анализа должен заниматься врач. Названия микроорганизмов часто указываются на латыни, что делает их непонятными для пациентов. Некоторые бактерии являются условно-патогенными, что означает, что они должны присутствовать в мазке, но в определенном количестве.

В заключении первой графой идет название возбудителя на латыни, затем его концентрация в мазке и уровень патогенности. В заключении обязательно указывается чувствительность обнаруженного микроорганизма к тому или иному антибиотику. Они указаны в виде отдельной таблицы.

В таблице указывается название антибактериального препарата и обозначения R (бактерия нечувствительна к препарату), I (бактерия относительно чувствительна), S (бактерия чувствительна к антибиотику).

Если говорить об урогенитальном мазке, то различают условно-патогенную и патогенную микрофлору:

  • Кокки. В результате они обозначаются, как «кокковая флора», «гр. и гр.- кокки». Кокки могут присутствовать в мазке в небольшом количестве, однако среди них есть и патогенные, например, к грамотрицательным коккам относят и гонококк, возбудителя гонореи, которого не должно быть в мазке здорового человека ни в каком количестве. Гонококк в результате обозначается как «gn».
  • Лептотрикс. Если в результате обнаруживается Leptotrix, это не говорит о серьезном заболевании. У женщин эта бактерия может обнаруживаться и в здоровом состоянии, но ее количество увеличивается, если присутствует другая инфекция.
  • Трихомонады. Эти микроорганизмы являются возбудителями трихомониаза, передающегося половым путем. Как правило, он обнаруживается при мазке из влагалища у женщин и уретры у мужчин. Если одновременно с трихомонадами обнаруживается и гонококк, и трихомонады способны поглощать кокки и защищать их от действия препаратов.
  • Микоплазма. Существует множество видов микоплазмы, некоторые из них постоянно обитают на слизистых оболочках и не приводят к заболеваниям. К патогенным видам относят уреаплазму и микоплазму гениталиум.
  • Листерии. Патогенные грамположительные бактерии, которые способны вызывать заболевание под названием листериоз, поражающее нервную систему человека.

С помощью бакпосева на микрофлору можно выявить разные инфекции половых и мочевыделительных путей

Бакпосев мочи и урогенитальной слизи помогает выявить множество бактериальных инфекций, поражающих мочеполовую систему:

  • Пиелонефрит. Это воспаление почечной ткани, вызванное бактериальной инфекции. В этом случае в анализе может обнаружиться кишечная палочка. Она может попадать в мочевые пути из кишечника и вызывать сильное воспаление. Пиелонефрит сопровождается сильным жаром, тошнотой, рвотой, болями в пояснице.
  • Бактериурия. Под этим понятием может скрываться целый ряд заболеваний мочевыделительной системы. В мочевом пузыре моча стерильна. Если в ней обнаруживаются бактерии, это говорит о наличии воспаления. Причиной могут быть камни в почках, у мужчин – простатит.
  • Гонорея. Это венерическое заболевание, которое поражает не только половые органы, но и мочевыделительную систему. Гонорея может вызывать болезненные ощущения при мочеиспускании, желтые выделения из влагалища у женщин и из уретры у мужчин. Бактерия может распространяться, поражая другие органы: глотку, кишечник, простату. Гонорея может протекать бессимптомно длительное время и при отсутствии лечения приводит к бесплодию.
  • Сифилис. Это венерическое заболевание, вызываемое бледной трепонемой. Симптомы сильно разнятся, но чаще всего сифилис сопровождается образованием язв на половых органах, распространением этих язв по всему телу.
  • Хламидиоз. Хламидиоз – одно из самых распространенных заболеваний, передающихся половым путем. Оно может длительное время протекать бессимптомно, в некоторых случаях может вызывать боли при мочеиспускании. Одним из осложнений хламидиоза является бесплодие.
  • Трихомониаз. При этом заболевании нередко появляется зуд в области половых органов, желтые выделения с неприятным запахом из влагалища у женщин, боль при мочеиспускании у мужчин. Трихомониаз нередко служит причиной простатита у мужчин.

Это не весь список заболеваний, определяемых с помощью бакпосева на микрофлору. Этот анализ нельзя отнести к разряду дешевых, и готовится он до 2 недель, поскольку материал помещают в питательную среду и ждут, пока бактерии начнут размножаться.

Результат бактериологического исследования

Результат бактериологического исследования стандартизирован и выдается в соответствии с выявленными этиологически значимыми микроорганизмами в количественном формате, в единицах измерения КОЕ/тамп, содержит антибиотикограмму и заключение, помогающее лечащему врачу лучше сориентироваться в предоставленной информации.

Производитель бактериофагов: ФГУП “НПО “Микроген” Минздрава России, Н.Новгород, Пермь, Уфа

Интерпретация проводится врачом с учетом клинических проявлений.

Внимание! Чувствительность к спектру антибиотиков проводится в случае обнаружения роста патогенной флоры, выявленной в любом количестве и условно-патогенной флоры в количестве более 104 КОЕ/тамп.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

»
[«serv_cost»]=>
string(4) «1150»
[«cito_price»]=>
NULL
[«parent»]=>
string(3) «542»
[10]=>
string(1) «1»
[«limit»]=>
NULL
[«bmats»]=>
array(6) {
[0]=>

array(3) {
[«cito»]=>
string(1) «N»
[«own_bmat»]=>
string(2) «12»
[«name»]=>
string(14) «Эякулят»
}
[1]=>
array(3) {
[«cito»]=>

string(1) «N»
[«own_bmat»]=>
string(2) «12»
[«name»]=>
string(54) «Секрет предстательной железы»
}
[2]=>
array(3) {
[«cito»]=>
string(1) «N»
[«own_bmat»]=>

string(2) «12»
[«name»]=>
string(55) «Мазок/отделяемое из влагалища»
}
[3]=>
array(3) {
[«cito»]=>
string(1) «N»
[«own_bmat»]=>
string(2) «12»
[«name»]=>

string(40) «Аспират полости матки»
}
[4]=>
array(3) {
[«cito»]=>
string(1) «N»
[«own_bmat»]=>
string(2) «12»
[«name»]=>
string(49) «Мазок/отделяемое из уретры»
}
[5]=>

array(3) {
[«cito»]=>
string(1) «N»
[«own_bmat»]=>
string(2) «12»
[«name»]=>
string(76) «Мазок/отделяемое из цервикального канала»
}
}
}

Результатом бакпосева является как качественная оценка (сам факт наличия возбудителя в исследуемом образце), так и количественная оценка (концентрация возбудителя в материале).

Расшифровка количественного результата проводится самым простым способом. Выделяют 4 степени роста (обсемененности) микроорганизмов в исследуемом материале. Для 1 степени роста характерен скудный рост только на жидкой среде, на твердой – роста нет;

Это важно для условно-патогенной флоры, при выявлении которой 1 и 2 степень не считают причиной болезни, это просто свидетельствует о загрязненности материала для исследования, 3-4 степени указывают на этиологию (причину) заболевания.

Результат подсчета колоний в КОЕ/мл расшифровывается следующим образом: 103/мл означает обнаружение 1 колонии; 104/мл – от 1 до 5 колоний; 105/мл – рост 5-15 колоний; 106/мл – более 15.Количественный результат важен не только для определения степени обсемененности, но и контроля правильности проводимого лечения.


Об авторе: Admin4ik

Ваш комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Adblock detector